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技術(shù)文章
20259-9
凍存管(CryogenicVial)和離心管(CentrifugeTube)是生物實(shí)驗(yàn)室中最常見(jiàn)的兩種管狀容器,盡管外形可能相似,但它們的設(shè)計(jì)初衷、核心功能和物理特性存在本質(zhì)區(qū)別。選擇錯(cuò)誤可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗甚至安全事故。一、凍存管和離心管的核心用途與設(shè)計(jì)目的1.離心管:主要用途:顧名思義,其核心設(shè)計(jì)是為了承受離心力。用于盛放液體樣品在高速離心機(jī)中進(jìn)行分離,例如分離細(xì)胞、沉淀蛋白質(zhì)、核酸提取等。次要用途:也常作為樣品的臨時(shí)儲(chǔ)存、混合、分裝和微量反應(yīng)的容器。它主要用于實(shí)驗(yàn)的“準(zhǔn)備與...
20258-25
標(biāo)題:細(xì)胞凋亡檢測(cè)全指南:從原理到方法選擇|附全流程避坑方案細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)?本文解析早期/晚期凋亡標(biāo)志物,對(duì)比流式/熒光/WB/電鏡6大技術(shù)優(yōu)劣,提供AnnexinV、JC-1、Caspase-3等核心指標(biāo)操作技巧!一、凋亡檢測(cè)為什么總失敗?三大核心痛點(diǎn)1.假陽(yáng)性高:壞死細(xì)胞混雜(未區(qū)分PI+/AnnexinV+)2.漏檢早期凋亡:僅檢測(cè)晚期指標(biāo)(如DNA斷裂)3.方法選錯(cuò):?組織切片用流式→樣本報(bào)廢?高通量篩選用電鏡→效率崩盤(pán)二、6大檢測(cè)方法全解析(附黃金選擇策略)1...
20258-23
標(biāo)題:如何選擇和使用Alzet2004泵?(操作指南與注意事項(xiàng))一、如何選擇和使用Alzet2004泵1.選型確認(rèn):2004型號(hào)是小鼠的標(biāo)準(zhǔn)選擇。務(wù)必根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需時(shí)長(zhǎng)(≤28天)和流速要求(0.25μL/h)確認(rèn)。2.藥物溶液準(zhǔn)備:使用推薦溶劑(常用生理鹽水或特定緩沖液)。確保藥物在溶劑和實(shí)驗(yàn)溫度下穩(wěn)定且可溶(混懸液需均勻且顆粒足夠小)。嚴(yán)格無(wú)菌操作!避免污染導(dǎo)致動(dòng)物感染或藥物失效。3.泵的灌注:使用專(zhuān)用填充管和提供的工具,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,確保完q填充無(wú)氣泡。4.植入手術(shù)...
20258-21
標(biāo)題:反轉(zhuǎn)錄和逆轉(zhuǎn)錄的區(qū)別一、反轉(zhuǎn)錄(ReverseTranscription)1.定義:以RNA為模板合成DNA的過(guò)程,逆轉(zhuǎn)中心法則方向(RNA→DNA)。2.核心要素:3.催化酶:反轉(zhuǎn)錄酶(ReverseTranscriptase,RTase)4.常見(jiàn)來(lái)源:逆轉(zhuǎn)錄病毒(如HIV)、嗜肝DNA病毒、端粒酶5.反應(yīng)本質(zhì):RNA指導(dǎo)的DNA合成6.分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn):RT-PCR:提取RNA→反轉(zhuǎn)錄為cDNA→PCR擴(kuò)增目標(biāo)基因cDNA文庫(kù)構(gòu)建:將mRNA逆轉(zhuǎn)錄為雙鏈DNA并克隆7...
20258-19
標(biāo)題:T細(xì)胞激活磁珠指南:高效擴(kuò)增/免疫治療核心工具|技術(shù)解析+選型攻略一、T細(xì)胞激活磁珠:免疫細(xì)胞治療革命的“發(fā)動(dòng)機(jī)”在CAR-T療法、腫瘤免疫治療、疫苗開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域,T細(xì)胞的高效激活與擴(kuò)增是成功的關(guān)鍵。傳統(tǒng)抗體刺激法存在激活效率低、細(xì)胞因子風(fēng)暴風(fēng)險(xiǎn)高、操作繁瑣等痛點(diǎn)。解決方案:T細(xì)胞激活磁珠——通過(guò)超順磁性微球偶聯(lián)CD3/CD28抗體,模擬體內(nèi)抗原遞呈,實(shí)現(xiàn):95%T細(xì)胞活化率(遠(yuǎn)超板包被法)擴(kuò)增倍數(shù)提升5-10倍精準(zhǔn)控制激活強(qiáng)度,降低細(xì)胞因子釋放綜合征(CRS)風(fēng)險(xiǎn)二、核...
20258-18
質(zhì)粒提取濃度低?6大核心原因+解決方案+避坑指南的知識(shí)干貨,分享給每位同學(xué)~一、質(zhì)粒濃度低直接后果:實(shí)驗(yàn)全線崩潰!當(dāng)質(zhì)粒濃度<50ng/μL時(shí):1.轉(zhuǎn)化失敗率↑300%2.測(cè)序信號(hào)弱(峰圖碎裂)3.酶切/連接效率暴跌立即排查以下6大關(guān)鍵環(huán)節(jié)!二、質(zhì)粒濃度低的6大核心原因+破解方案原因1:菌體量不足(占比~35%)錯(cuò)誤操作:?OD???<0.6收菌→菌數(shù)太少?離心轉(zhuǎn)速<6000g→菌體丟失解決方案:收菌標(biāo)準(zhǔn):OD???=0.8-1.0(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)離心參數(shù):≥12,000g×2...
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